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紫外可見分光光度計(jì)的定量分析校正
更新時(shí)間:2016-08-23 點(diǎn)擊次數(shù):2231
   在紫外可見分光光度計(jì)等光譜儀器定量分析中,一般在分析樣品前都需要采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)儀器進(jìn)行校正,即建立儀器響應(yīng)信號(hào)與被分析物質(zhì)濃度的關(guān)系。根據(jù)儀器校正操作方式的不同,常用的校正方法有三種:工作曲線法、標(biāo)準(zhǔn)加入法和內(nèi)標(biāo)法。具體在進(jìn)行定量分析時(shí),選擇哪一種校正方法,應(yīng)考慮儀器方法特點(diǎn)、待測(cè)試樣基質(zhì)中存在的干擾程度等因素,才能得到準(zhǔn)確可靠的數(shù)據(jù)。
  (1)工作曲線法  工作曲線法又稱為外標(biāo)法。它是首先用一系列已知濃度的標(biāo)試樣校正儀器,即依次測(cè)量各標(biāo)準(zhǔn)試樣的儀器響應(yīng)值,以各標(biāo)準(zhǔn)試樣得到的響應(yīng)與其中分析物濃度建立一定的關(guān)系曲線。然后在棚同的條件下,測(cè)定待測(cè)試樣的響應(yīng)值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)試樣響應(yīng)值與濃度關(guān)系計(jì)算待測(cè)試樣的濃度。通常情況下,工作曲線在線性范圍內(nèi),分析物在儀器上的響應(yīng)與其濃度有線性關(guān)系。對(duì)于非線性工作曲線需要大量的校正數(shù)據(jù),以準(zhǔn)確地確定儀-器的響應(yīng)和濃度之間的關(guān)系。工作曲線法采用zui小二乘法進(jìn)行處理,直接計(jì)算試樣的濃度。該方法適用范圍廣,是儀器分析中zui基本的定量方法。為了提高測(cè)定的準(zhǔn)確度,繪制工作曲線的條件應(yīng)與測(cè)定試樣的條件盡量保持一致,否則不宜用此法。
  (2)標(biāo)準(zhǔn)加入法  標(biāo)準(zhǔn)加入法又稱增量法。該方法是將已知量的標(biāo)準(zhǔn)試樣加入到一定量的待測(cè)試樣中即制備加標(biāo)試樣,通過測(cè)定不同加標(biāo)量的加標(biāo)試樣的儀器響應(yīng)值(或其函數(shù))后,進(jìn)行定量分析待測(cè)試樣含量的方法。
  標(biāo)準(zhǔn)加入法如只進(jìn)行一次加標(biāo),根據(jù)未加標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)試樣與加標(biāo)試樣的儀器響應(yīng)值,可用一定的關(guān)系式進(jìn)行計(jì)算獲得待測(cè)試樣含量。也可通過多個(gè)不同添加量加標(biāo)(其它*一樣),以加標(biāo)試樣的儀器響應(yīng)值對(duì)標(biāo)準(zhǔn)試樣添加量繪制工作曲線。根據(jù)曲線外推在橫坐標(biāo)上的截距值為待測(cè)試樣含量。
  (3)內(nèi)標(biāo)法  內(nèi)標(biāo)法是在試樣和各含量不同的一系列標(biāo)準(zhǔn)試樣中,分別加入固定量的待測(cè)物質(zhì)以外的純物質(zhì),即內(nèi)標(biāo)物。同時(shí)測(cè)得加入內(nèi)標(biāo)的標(biāo)準(zhǔn)試樣中锎吁物和內(nèi)標(biāo)物對(duì)應(yīng)的響應(yīng),以分析物和內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)比對(duì)分析物濃度作圖,即可得到相應(yīng)的內(nèi)標(biāo)法校正曲線。zui后用測(cè)得的試樣與內(nèi)標(biāo)物的響應(yīng)比在校正曲線上獲得對(duì)應(yīng)于試樣的濃度。內(nèi)標(biāo)法實(shí)際上是外標(biāo)法的一種改進(jìn)。
  對(duì)于儀器精密度相對(duì)較差或影響響應(yīng)參數(shù)較多的儀器,采用內(nèi)標(biāo)法可減少儀器波動(dòng)對(duì)結(jié)果的影響,從而獲得更的分析結(jié)果。使用內(nèi)標(biāo)法時(shí),應(yīng)正確選擇內(nèi)標(biāo)物及濃度。一般內(nèi)標(biāo)物在物理和化學(xué)性質(zhì)上要類似于分析物,內(nèi)標(biāo)物信號(hào)既不能干擾分析物,又不能被試樣中其它組分干擾,并且易于測(cè)量。內(nèi)標(biāo)物的濃度與分析物的濃度應(yīng)控制在同一數(shù)量級(jí)上。

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