紫外可見分光光度計曲線設置
吸收曲線又稱吸收光譜,是以波長λ(nm)為橫坐標,以吸光度A為縱坐標所描繪的曲線。曲線設置包括K系數(shù)法,單點標定和多點標定。實際操作如下:(上海奧析科學儀器有限公司型號UV1700PC紫外可見分光光度計儀器開機自檢進入定量分析,應用方法和曲線設置選擇曲線設置。)
1.單點標定
有兩種方法實現(xiàn)單點標定。一、直接輸入法。二、測量獲得法。使用直接輸入法可以點擊下方的濃度和吸光度文本框,分別輸入濃度和吸光度即可。使用測量獲得法可以通過測量標準樣品的吸光度來獲得吸光度,同時輸入標準樣品的濃度即可獲得一根標準曲線。(CONC=Bconc/BABS)B代表標準樣品。操作如下:放入參比樣品后,對該波長進行調滿度,再單擊【樣品測試】鍵進入測量標準樣品吸光度的畫面。進入樣品測試畫面后直接點擊【測試】鍵獲得吸光度。獲得吸光度后按【退出】鍵退出該畫面并返回定量參數(shù)設置畫面,在定量參數(shù)設置畫面中的吸光度處自動更新為剛才測量獲得得吸光度。此時再按【確認】鍵即可開始測量被測樣品。
2.K系數(shù)法
在下面的斜率和截距文本框中分別輸入斜率和截距即可。此時的測量方法將封閉。同時標準曲線建立。(CONC=K*ABS+B)
3 多點標定
有兩種方法實現(xiàn)多點標定。一、直接輸入法。二、測量獲得法。
本例以5個標樣和建立1此方程曲線,以測量方式來獲得吸光度。操作如下:
*步:確定標準樣品的個數(shù),和所建立方程次方。分別在標樣個數(shù)和曲線次方后的文本框中輸入5和1.
第二步:選中測量方法中的測量數(shù)據(jù)。
第三步:放入參比樣品單機調零鍵對參比樣品在該波長下調滿度。
第四步: 按確認鍵進入建立方程階段。進入建立方程畫面后首先輸入標準樣品的濃度,此時可以通過輸入樣品濃度的實際個數(shù)來修改標樣的個數(shù)。輸入結束后,依次放入標準樣品,再點擊[讀取標樣值]按鍵。分別讀出標樣的吸光度,經過幾次平均后并自動寫入相應濃度的吸光度中。再點擊[建立方程]按鍵,完成了方程的建立,同時可以看到方程的系數(shù)和相關系數(shù)及方程曲線。(圖如下4-10、4-11、4-12)可以直接按[測試未知樣品]按鍵對未知樣品進行測試。
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