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UV1901紫外可見分光光度計測葉綠素含量的方法
紫外可見分光光度計時實驗室里zui常用，也是對分析人員來說zui有用的分析工具之一。幾乎每個分析實驗室都離不開紫外可見分光光度計。其原理是根據(jù)物質(zhì)分子對光的選擇性吸收特性所建立起來的一種定性、定量的分析方法。操作簡單、準確度高、重現(xiàn)性好。分光光度計測量是關(guān)于物質(zhì)分子對不同波長和特定波長處的光的吸收程度的測量。物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有不同的分子、原子和不同分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這是分光光度計定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度計分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
UV1901紫外可見分光光度計測葉綠素含量的原理：測定葉綠素提取液在zui大吸收波長下的吸光值，即可用朗伯—比爾定律計算出提取液中各色素的含量。
葉綠素a 和葉綠素b 在645nm 和663nm 處有zui大吸收，且兩吸收曲線相交于652nm 處。因此測定 提取液在645nm、663nm、652nm 波長下的吸光值，并根據(jù)經(jīng)驗公式可分別計算出葉綠素a、葉綠素b 和總?cè)~綠素的含量。
儀器 
UV1901紫外可見分光光度計（上海奧析科學儀器有限公司）
UV1901紫外可見分光光度計采用濱松無臭氧環(huán)保型氘燈，普通長壽命氘燈會有臭氧產(chǎn)生，長期吸入對身體有害，無臭氧長壽命氘燈就可以有效避免。儀器還采用德國歐士朗鎢燈，美國派來芝檢測器，雙光束光學系統(tǒng)，加厚光學底板，更能保證儀器的穩(wěn)定性。操作界面和操作系統(tǒng)都是簡便快捷版的，減少了檢測時間的同時，增加準確性.吸光度可以到小數(shù)點后四位?？蛇x配多種附件，自動四聯(lián)池，七聯(lián)池，恒溫裝置，透過率固體架，反射率固體架等。

UV1901紫外可見分光光度計的顯示方式：6英寸 320×240 點陣帶背光數(shù)字 LCD 
光源燈：預(yù)調(diào)日本濱松無臭氧環(huán)保型氘燈 歐司朗長壽命鹵鎢燈 
光學系統(tǒng)：精密雙光束光學系統(tǒng)
接口：RS232C串行通訊口用于接配軟件，并行打印口用于接配打印機
光譜掃描功能：主機及軟件支持
電源電壓：100V～240V   50/60±1Hz
儀器尺寸：650×450×220（mm）
凈重：25Kg
特點
UV1901紫外可見分光光度計的光學系統(tǒng)設(shè)計和電路控制系統(tǒng)設(shè)計十分嚴謹,元器件的選用控制嚴格,具有高標準的準確度、重復(fù)性、低噪聲和低雜散光指標，線性范圍和穩(wěn)定性指標也十分出色。有1nm和2nm帶寬兩種配置適合不同用戶選擇，大屏幕LCD顯示，具高測量精度和穩(wěn)定性，是一款高品質(zhì)的儀器。
UV1901紫外可見分光光度計使用日本濱松無臭氧環(huán)保型氘燈，使用壽命達到2000小時，光輸出可保持穩(wěn)定直至其使用壽命，替換極為方便。
UV1901紫外可見分光光度計提供2種操作模式：主機測量模式或軟件控制測量模式。
內(nèi)建的SCM技術(shù)和定性定量分析軟件能實現(xiàn)數(shù)據(jù)采集與處理、光譜測量、動力學測量、定量分析、DNA測定和光譜掃描等擴展功能。菜單下拉式分析軟件易于操作。
UV1901紫外可見分光光度計具有開放式的樣品室，可選配反射樣品架、固體樣品架、恒溫水浴和自動進樣器等適合于不同的應(yīng)用。
單機掃描曲線可以存儲9條，工作曲線可以存儲9條。聯(lián)機模式儲存數(shù)量不限。
主要技術(shù)指標   
型號    UV1901型    UV1902型
測光方式    透過率，吸光度，能量，反射率
光譜帶寬    1nm    2nm
波長范圍    190nm～1100nm
波長準確度    ≤±0.3nm
波長重復(fù)性    ≤0.1nm
★光度范圍    0-999.9%(?),-4A～4A，0-9999C，1-9999F
光度準確度       ≤±0.3%(?) (0～100%?)
≤±0.002A(0～0.)
≤±0.004A(0.5～1A)
光度重復(fù)性      ≤0.15%(?) (0-100%?)
≤0.001A(0～0.)
≤0.002A(0.5～1A)
雜光    ≤0.03%(?) （220nm NaI，360nm NaNO2））
★穩(wěn)定性         ≤±0.0004A/h（500nm，開機預(yù)熱30min）
噪聲    ≤±0.0003A
★基線平直度    ≤±0.001A（190～1100nm）    ≤±0.0008A（190～1100nm）
★導(dǎo)數(shù)分辨率    >0.5
掃描速度    快      中     慢

分析軟件
舒適的操作感受和豐富的分析功能--UVCON系列定性定量數(shù)據(jù)處理分析軟件

UVCON系列定性定量數(shù)據(jù)處理分析軟件是為上海奧析科學儀器有限公司的1700、1800和1900三個系列儀器的分析軟件。通過通訊電纜將儀器主機的RS232C通訊口與電腦上的串行通訊口或USB口聯(lián)接，利用軟件對主機的運行進行控制，并對主機采集到的數(shù)據(jù)進行分析、處理或輸出，幫助完成從常規(guī)質(zhì)控到環(huán)保、生物化學、醫(yī)學衛(wèi)生、材料等諸多領(lǐng)域的分析研究。

動力學測量可測定從1秒-10小時的透射比或吸光度的時間變化，記錄間隔從0.1-60秒，可以觀察快速的反應(yīng)和變化。在數(shù)據(jù)處理功能中有峰谷檢測和導(dǎo)數(shù)運算。

電子頂載天平(感量0．01g)、研缽、棕色容量瓶、小漏斗、定量濾紙、吸水紙、擦境紙、滴管。 原料新鮮(或烘干)的植物葉片 試劑 1. 96％乙醇(或80％丙酮) 2. 石英砂 3. 碳酸鈣粉 
四、操作步驟
取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料，擦凈組織表面污物，去除中脈剪碎。稱取剪碎的新鮮樣品2g，放入研缽中，加少量石英砂和碳酸鈣粉及3mL95％乙醇，研成均漿，再加乙醇10mL，繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3～5min。 
取濾紙1張置于漏斗中，用乙醇濕潤，沿玻棒把提取液倒入漏斗，濾液流至100mL 棕色容量瓶中；用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘渣數(shù)次，zui后連同殘渣一起倒入漏斗中。 用滴管吸取乙醇，將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘渣中無綠色為止。zui后用乙醇定容至100mL，搖勻。 取葉綠體色素提取液在波長665nm、645nm 和652nm 下測定吸光度，以95％乙醇為空白對照。
五、計算 
按照實驗原理中提供的經(jīng)驗公式，分別計算植物材料中葉綠素a、b 和總?cè)~綠素的含量。